一、引言 對于由于含有少量雜質(zhì)而發(fā)生了熔點降低的低共熔體系，采用差示掃描量熱分析儀（DSC）進行純度分析是一個簡便而又可靠的方法。物質(zhì)的熔融行為受雜質(zhì)的影響，在多數(shù)有機物會發(fā)生的低共熔體系中，隨著雜質(zhì)濃度的增大，熔點會降低，熔程會變寬。DSC純度分析方法，就是利用物質(zhì)的熔融曲線，來算出該物質(zhì)的雜質(zhì)含量的。 本文采用DSC方法，對核酸藥物原料腺苷（AR）、胞苷（CR）和尿苷（UR）進行純度分析，以研究DSC純度分析方法用作生產(chǎn)中質(zhì)量控制的可能性和可靠性。 二、原理 DSC純度分析的基礎是Van’t Hoff方程：T[sub]1[/sub]=T[sub]0[/sub]x[sub]2[/sub]（RT[sub]0[/sub][sup]2[/sup]/ΔH[sub]1[/sub]），式中T[sub]1[/sub]為熔融溫度、T[sub]0[/sub]為純組分（主要組分）的熔點、x[sub]2[/sub]為組分2（雜質(zhì)）在液相中的摩爾分數(shù)、R為氣體常數(shù)、H[sub]1[/sub]為主要組分的熔融熱。 在低共熔體熔點之上，全部雜質(zhì)均在液相中，固相中是純物質(zhì)，隨著進一步加熱，純物質(zhì)溶解于低共熔體溶液中，從而以下式所示的比例關系稀釋雜質(zhì)：x2=x2’（1/F），其中x2’為原始樣品中雜質(zhì)的摩爾分數(shù)，F(xiàn)為已熔分數(shù)=A部分/A全部，A部分是熔融曲線相關點處的部分面積，A全部是熔融峰的總面積。 線性化處理：由于兩個原因需要作線性化處理，一是低共熔物常常不包含在計算中（在實驗開始時熔化），因此A部分和A全部的值太??；二是熔化時熔融速率快速上升，適用于平衡條件的Van’t Hoff定律不再精確。 所需校正因子為c，即1/F=（A部分+c）/（A全部+c），于是摩爾熔融熱H1=[（A部分+c）/m]M，其中m為樣品質(zhì)量，M為主要組分的摩爾質(zhì)量。 在Van’t Hoff方程中用x2、1/F和?H1代入后重排得到多項線性方程： A部分=-c+T0A部分/T1+（T0c-RT02x2’m/M）T1 計算機軟件用最小二乘法同時計算三個未知數(shù)c、T0和x2’。 計算純度時所用的熔融峰的區(qū)域：限于曲線峰高的10%至50%，以排除開始液相中高雜質(zhì)濃度部分和到達峰頂時熔融速率過高的部分。 三、實驗 樣品：上海太平洋生物高科技有限公司提供，3種樣品各2個，分別為腺苷AR001和AR002、胞苷CR001和CR002、尿苷UR001和UR002，除UR001外，均經(jīng)過純化。 差示掃描量熱分析儀：梅特勒-托利多DSC820 PC軟件：梅特勒-托利多熱分析STARe軟件DSC Purity。 四、結(jié)果與討論 AR、CR和UR三種物質(zhì)，每種2個共6個樣品，每個樣品隨機取樣測3次。下圖為樣品UR002的DSC曲線，可見曲線形狀、熔點、熔程、峰溫等重復性很好，其DSC純度數(shù)據(jù)非常一致；其他各個樣品的DSC曲線與之相似，不一一例示。所有樣品的DSC純度數(shù)據(jù)列于表中。除了未經(jīng)純化處理的UR001樣品，其他樣品的純度均在98%以上，其中三個002樣品作過進一步純化，它們的純度均達到99%以上。核酸藥物原料的純度>98%即符合質(zhì)量指標。 [align=center] 圖：阿司匹林儲存期的測算[/align] 表：核酸藥物原料AR、CR和UR的DSC純度分析結(jié)果 五、結(jié)論 對較高純度（>95%）的低共熔體系，用DSC測試其雜質(zhì)含量是非常方便而可靠的。對于核酸藥品原料AR、CR和UR的純度（質(zhì)量指標>98%），可用DSC作為質(zhì)量控制的檢測手段。