合肥物質(zhì)科學研究院構建細菌生物傳感器實現(xiàn)水環(huán)境砷的快速檢測

時間:2015-05-04

來源:網(wǎng)絡轉載

導語:項目組成員利用帶有綠色熒光蛋白的報告載體,以砷誘導型啟動子為起始材料,利用易錯PCR和DNA重組技術獲得啟動子突變文庫。通過基于流式細胞儀的熒光激活細胞分選(FACS)篩選手段,定向進化得到靈敏、專一、高效的砷誘導型啟動子,從而構建更加靈敏高效的砷的細菌生物傳感器。

近期,中國科學院合肥物質(zhì)科學研究院技術生物與農(nóng)業(yè)工程研究所環(huán)境毒理與生態(tài)研究室研究員吳李君課題組在細菌生物傳感器對水環(huán)境中砷的快速檢測方面取得新進展。研究針對砷這一危害較大的環(huán)境污染物,通過定向進化技術構建更加靈敏高效的砷的細菌生物傳感器,實現(xiàn)了方便易行、低成本的砷的快速檢測。上述研究成果已被國際環(huán)境科學期刊Environmentalscience&technology(2015;DOI:10.1021/acs.est.5b00832)接受發(fā)表。

項目組成員利用帶有綠色熒光蛋白的報告載體,以砷誘導型啟動子為起始材料,利用易錯PCR和DNA重組技術獲得啟動子突變文庫。通過基于流式細胞儀的熒光激活細胞分選(FACS)篩選手段,定向進化得到靈敏、專一、高效的砷誘導型啟動子,從而構建更加靈敏高效的砷的細菌生物傳感器。研究結果顯示:進化后的砷的細菌生物傳感器ep3,其相對誘導活性比野生型提高了12倍,并且對砷的響應時間縮短了一倍,可在45分鐘內(nèi)獲得良好的熒光響應;在實際誘導操作中,進化后的砷細菌生物傳感器可使用平臺期菌作為出發(fā)菌,較之傳統(tǒng)的誘導操作選用對數(shù)期菌減少了2-3小時的前期準備時間,使其在實際檢測中操作更加方便便捷;面對復雜水環(huán)境中的離子等干擾時,進化后的砷細菌生物傳感器的生長和熒光響應都沒有出現(xiàn)明顯的異常,表明其在實際復雜水環(huán)境檢測中具有一定的抗干擾能力;進化后的砷細菌生物傳感器對砷污染的內(nèi)蒙古井水進行檢測結果,和電感耦合等離子體質(zhì)譜(ICP-MS)方法檢測結果非常接近,說明該砷細菌生物傳感器可以成功地作為一種新型、簡便、廉價的環(huán)境砷的檢測方法。

該項目受到國家重大研究計劃、中科院先導專項B,以及研究院院長基金資助。

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